線粒體是細(xì)胞的能量工廠，其功能還涉及細(xì)胞代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、分化、生長(zhǎng)、凋亡和死亡等多個(gè)重要生理過(guò)程。線粒體自噬(mitophagy)是細(xì)胞清除損傷或衰老的線粒體，并循環(huán)利用其組成元素的過(guò)程，因此線粒體自噬的研究具有重要意義。目前，對(duì)線粒體自噬的研究主要采用抗體或熒光蛋白標(biāo)記法，或線粒體熒光探針和溶酶體熒光探針組合使用共同檢測(cè)。但前者操作復(fù)雜，在活細(xì)胞中應(yīng)用受到限制；而后者特異性較低。
對(duì)pH敏感的探針?lè)肿?/span>HQO無(wú)需與其它探針?lè)肿咏M合使用，其進(jìn)入活細(xì)胞后選擇性富集于線粒體；當(dāng)線粒體發(fā)生自噬形成自噬溶酶體后其微環(huán)境pH下降，導(dǎo)致HQO質(zhì)子化；質(zhì)子化后HQO的熒光激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)均發(fā)生紅移（斯托克斯位移大于100 nm）。由于微環(huán)境pH值的不同，使得HQO在線粒體和自噬溶酶體中呈現(xiàn)不同顏色的熒光，因而可以很好地區(qū)分正常線粒體和包被損傷線粒體的自噬溶酶體。HQO分子可精確定位線粒體，準(zhǔn)確示蹤線粒體自噬過(guò)程；該探針?lè)肿訉榫€粒體代謝過(guò)程提供新的研究方法，也為篩選線粒體自噬抑制劑或促進(jìn)劑提供有效的工具。
HQO具有兩個(gè)激發(fā)與相應(yīng)發(fā)射波長(zhǎng)，一個(gè)示蹤線粒體，一個(gè)示蹤自噬溶酶體，通過(guò)兩個(gè)波長(zhǎng)的變化來(lái)闡述自噬流程。和已有常規(guī)自噬檢測(cè)方法相比，它具有如下優(yōu)勢(shì)：①樣品制備簡(jiǎn)單；②操作步驟少；③特異性指示線粒體被噬到自噬溶酶體形成的過(guò)程，且能特異性指示局部線粒體的被噬；④所需相應(yīng)耗材及工具較少。[1]
圖一：探針HQO和HQO示蹤活細(xì)胞線粒體自噬過(guò)程原理圖
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產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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簡(jiǎn)稱
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CAS
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結(jié)構(gòu)式
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2668725
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2,6-雙（2-（3,3-二甲基-1-丙基 - 二氫吲哚-2-亞基）亞乙基） - 環(huán)己酮
2,6-Bi(2-(3,3-dimethyl-1-propylindolin-2-ylidene)ethylidene)-cyclohexanone
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HQO
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1442645-34-2
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產(chǎn)品使用說(shuō)明：
1、細(xì)胞的培養(yǎng)，將細(xì)胞種植于共聚焦培養(yǎng)皿中，根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)需要種植相應(yīng)細(xì)胞密度及培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間。
2、誘導(dǎo)自噬、細(xì)胞染色和共聚焦成像。適當(dāng)條件誘導(dǎo)自噬（如無(wú)血清培養(yǎng)基、PBS或者細(xì)胞自噬激活劑處理等），HQO（10 μM）于無(wú)血清培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)皿中37℃孵育10 min，PBS洗滌一到三次，共聚焦成像。559 nm激發(fā)，570-610 nm發(fā)射波長(zhǎng)為示蹤正常線粒體的熒光；635 nm激發(fā)，650-730 nm發(fā)射波長(zhǎng)為示蹤自噬溶酶體的熒光。
更多熒光探針產(chǎn)品
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產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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CAS
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結(jié)構(gòu)式
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2668724
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2,9-雙[4-（4-甲基哌嗪-1-基）苯乙烯基]-1,10 - 菲咯啉
2,9-Bis[4-(4-methylpi-perazin-1-yl)styryl]-1,10-phenanthroline
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1792998-33-4
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2668726
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N-己酸基-4H-1,2,4-三氮唑(1,5-a)二氮雜環(huán)-1,8-萘酰亞胺
3,9-Dihydro-1,3-dioxopyrido[3,4,5-gh][1,2,4]triazolo[1,5-a]perimidine-2(1h)-hexanoic acid
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1359819-97
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2668727
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CSTS
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N/A
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.jpg)
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433521
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D-熒光素鉀鹽
D-Luciferin potassium salt
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115144-35-9
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.jpg)
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102273
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2,3-二氨基萘
2,3-Diaminonaphthalene
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771-97-1
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2668723
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9-甲基-3,6-雙[5-（4-甲基哌嗪-1-基）-1H-苯并[d]咪唑-2-基] -9H-咔唑
9-Methyl-3,6-bis[5-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl]-9H-carbazole
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1514901-89-3
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227585
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鄰苯二甲醛
o-Phthalaldehyde
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643-79-8
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相關(guān)文獻(xiàn)
[1] Ying Liu, Jin Zhou, Linlin Wang, Xiaoxiao Hu, Xiangjun Liu, Meirong Liu, Zehui Cao, Dihua Shangguan and Weihong Tan. A Cyanine Dye to Probe Mitophagy: Simultaneous Detection of Mitochondria and Autolysosomes in Live Cells, J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (38), pp 12368–12374, DOI: 10.1021/jacs.6b04048；
■ 其他配套產(chǎn)品：